Реакция Вассермана, анализ крови на сифилис

Cодержание статьи:

• Анализ крови на сифилис – RW-методика
• Описание методики
• Катализатор реакции Вассермана, как делают RW анализ
• Как подготовиться к анализу крови RW на сифилис
• Как проводят анализ крови на сифилис, как делают реакцию Вассермана
• Исследование спинномозговой жидкости, что такое, как делают
• Расшифровка результатов анализов
• Степень погрешности, насколько точны результаты анализа на сифилис

Анализ крови на сифилис – RW-методика

RW-анализ крови на сифилис, также известный, как реакция Вассермана, применяется уже более ста лет и не думает сдавать завоеванные позиции. В плане эффективности данная методика, отличающаяся крайней простотой и в то же время высоким уровнем надежности, не имеет себе равных. Все современные тесты, разработанные с целью диагностики сифилиса на ранней стадии развития болезни, в той или иной мере воспроизводят классическую реакцию Вассермана. И все же, как бы производители подобных анализаторов ни старались, полностью заменить изобретение, которое получило широкое распространение по всему миру и спасло миллионы жизней, они пока не могут, а вот дополнить исследование, подтвердить уже полученные данные им вполне под силу.

Описание методики

Что представляет собой RW-анализ? По сути, это лабораторное исследование сыворотки крови или спинномозговой жидкости на предмет специфического отклика организма на кардиолипин – антиген возбудителя сифилиса (бледной трепонемы). Дело в том, что столкнувшись с подобным «врагом», организм начинает вырабатывать антитела, которые обезоруживают трепонему за счет реакции связывания комплемента (РСК). Эти антитела, образующие устойчивое соединение с возбудителем сифилиса, постоянно присутствуют в крови и спинномозговой жидкости зараженного человека, однако обнаружить их не так-то просто. Здесь и приходит на помощь реакция Вассермана.

Поэтапное описание анализа выглядит следующим образом:

1 Пациенту вводят препарат с кардиолипином с целью провоцирования РСК.

2 Следом за «провокатором» в дело вступает гемолитическая система, запускающая процесс гемолиза.

3 Сформировавшиеся комплексы нейтрализуются с помощью комплемента.

Если человек болен сифилисом, в его крови и спинномозговой жидкости сразу же после ввода «провокатора» начинают формироваться соединения «антиген-антитело», которые без проблем идентифицируются специалистами-лаборантами. Процесс прекращается тогда, когда иссякает кардиолипин, который вводят в строго ограниченном объеме. Далее в дело вступает комплемент, обезвреживающий образовавшиеся соединения. После того, как данное вещество выполнит свою задачу, специалисты, проводящие исследование, заполняют таблицу, где указывают, с какой скоростью протекала РСК и сколько комплексов образовалось за отведенный промежуток времени. Интенсивность реакции оценивается по шкале от (+) до (++++). От полученных результатов зависит, как и чем будут лечить пациента и то, сколько времени это займет.

Если человек здоров, кардиолипин нейтрализуется еще на стадии введения гемолитической системы. Ввиду отсутствия в крови и спинномозговой жидкости пациента специфических антител, введенный ранее антиген не образует комплексы, а вступает в реакцию гемолиза, вследствие чего его активность довольно быстро сходит на нет.

Катализатор реакции Вассермана, как делают RW анализ

В роли катализатора реакции Вассермана выступает препарат, в состав которого входят три вещества:

1 Антиген бледной трепонемы, получаемый путем обработки возбудителя болезни ультразвуком либо посредством многоуровневой очистки спиртового липидного экстракта, извлеченного из мышечных волокон бычьего сердца (во втором случае к антигену добавляют лецитин, фосфолипид и холестерин, призванные усилить реакцию).

2 Гемолитическая система на основе гемолитической сыворотки из крови кролика и осла, иммунизированной эритроцитами барана в возрасте от одного года до четырех лет.

3 Комплемент, изготовленный из кровяной сыворотки морских свинок.

Указанные компоненты смешиваются в равном количестве (по двадцать пять или пятьдесят миллилитров), после чего готовый препарат используют по назначению.

Как подготовиться к анализу крови RW на сифилис

Забор крови для проведения анализа осуществляется натощак или спустя семь-восемь часов после последнего приема пищи. Материал для исследования берется из локтевой вены в объеме, равном девяти-десяти миллилитрам. У детей в возрасте до года кровь берут из пятки, предварительно надрезав кожу и ткани в указанной области специальным скальпелем. Полученный материал направляют в лабораторию в тот же день. Если по какой-либо причине этого сделать не удалось, пробирку помещают в камеру с определенным температурным режимом, где материал хранится до следующего дня. Кровь сохраняет свои свойства в течение двух суток: по истечении указанного срока толку от нее уже не будет – придется сдавать ее повторно.

При наличии следующих обстоятельств забор крови не осуществляется:

1 повышенная температура тела;

2 критические дни;

3 период восстановления после недавно перенесенной болезни инфекционного характера;

4 предстоящие роды и послеродовый период;

5 употребление алкоголя накануне процедуры;

6 возраст ребенка менее двух недель.

При отсутствии противопоказаний забор крови осуществляется в плановом режиме. Из полученного материала изготавливают сыворотку, которую затем используют для анализа. Происходит это следующим образом:

1 Извлеченную из вены пациента кровь помещают в термостат, внутри которого поддерживается температура в 37 ºС.

2 Когда кровь загустеет (данный процесс занимает от пятнадцати минут до получаса), в дело вступает центрифуга, совершающая около тысячи оборотов в минуту.

3 Примерно через пятнадцать минут непрерывной работы центрифуги над кровяным сгустком появляется прозрачная жидкость – кровяная сыворотка – которую извлекают для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, жидкость помещают обратно в центрифугу.

4 Очищенная от эритроцитов сыворотка инактивируется при температуре 55-57 ºС (данный процесс занимает в среднем полчаса).

Инактивированную сыворотку, лишенную естественного комплемента, используют по назначению либо помещают в холодильник, где она хранится несколько дней (но не более недели).

Как проводят анализ крови на сифилис, как делают реакцию Вассермана

Исследование крови на сифилис осуществляется следующим образом:

1 Три пробирки заполняют кровяной сывороткой, разбавленной раствором натрия хлорида.

2 В первую пробирку добавляют двадцать пять миллилитров антигена, во вторую – аналогичное количество кардиолипина, в третью (контрольную) доливают раствор хлорида натрия.

3 Во все пробирки добавляют комплемент.

Чтобы результаты анализа оказались максимально точными, заранее компоненты не смешивают. Далее происходит следующее:

1 Пробирки помещают в термостат, поддерживающий температуру 36-38 ºС (первичная инкубация).

2 Через сорок-пятьдесят минут в подогретую жидкость вводят гемолитический состав в объеме, не превышающем пяти миллилитров, после чего интенсивно встряхивают пробирки.

3 Сосуды помещают обратно в термостат.

После введения гемолитической системы в пробирках начинается реакция, за которой внимательно следят специалисты-лаборанты. Окончательный вердикт выносится после сравнения полученных данных с контрольными образцами – дополнительными пробирками, одна из которых заполнена кровью, инфицированной бледной трепонемой, а другая – чистой кровью.